2.2氧消耗

在15°C下測定總氧消耗率(TOCR)。將糞液樣品在密閉容器中(Labco Exetainer,英格蘭海威科姆)攪動約30秒,直到糞液中的氧達(dá)到至少50%的飽和度。在這個通氣過程之后,立即(通氣后不到10秒)通過一個快速響應(yīng)氧傳感器(90%響應(yīng)時間<5秒)在糞液中在線監(jiān)測氧的減少,直到無氧。生物氧消耗率(BOCR)是在樣品中氧化26-28小時后確定的,其中樣品在攪拌臺上在大氣空氣下攪拌。延長的氧化期間的BOD測定測定的是樣品中化學(xué)可氧化的化合物。然后根據(jù)先前對TOCR的描述來測定BOCR,不得與標(biāo)準(zhǔn)BOD測定混淆。將在已進(jìn)行5分鐘85°C熱處理以殺滅微生物的樣品中測定化學(xué)氧消耗率(COCR)。在封閉容器中進(jìn)行這種巴氏消毒,沒有氣體空間,以保持糞液無氧并避免化合物從液相中揮發(fā)失去。冷卻至15°C后,引入了氣相,通過大約30秒的攪拌將糞液氧化到至少50%的空氣飽和度,如前所述。COCR按照TOCR的描述進(jìn)行測量

2.3分析氧消耗反應(yīng)動力學(xué)

化學(xué)耗氧量假定遵循一級反應(yīng)動力學(xué)(指數(shù)衰減)。dC/dt=-k1C(1),其中C為氧濃度,t為時間。COCR,用衰減常數(shù)k1b表示,通過將過去樣品的氧衰減數(shù)據(jù)擬合到方程(1)中來估算。

生物耗氧量假定表現(xiàn)出零階反應(yīng)動力學(xué)(線性衰減,方程(2))。BOCR直接從氧化26-28小時的樣品中估算。在這些樣品中,假設(shè)化學(xué)可氧化的化合物已被消耗。因此,通過線性回歸確定了表示BOCR的線性衰減常數(shù)k?b(方程(2))。dC/dt=-k?(2)

對于未處理的樣品,應(yīng)用組合反應(yīng)動力學(xué)并擬合到TOCR的測量數(shù)據(jù)(方程(3))。dC/dt=-k1C-k?(3)

在15℃下,典型污泥中的氧溶解度約為290mM。根據(jù)Henze等人(2003)的研究,好氧微生物的典型半飽和常數(shù)Km小于1-2mM。當(dāng)C相對于溶解度較小時但仍遠(yuǎn)高于Km時,根據(jù)初始觀察,可以假設(shè)k1C≈k?,并且衰減接近線性。因此,可以通過在氧濃度較低的情況下對衰減曲線的斜率進(jìn)行粗略估計k?,然后通過方程(3)隔離出指數(shù)衰減常數(shù)k?。這種方法被用于粗略估計指數(shù)衰減常數(shù)k1a以及線性衰減系數(shù)k2a,從而從未處理的污泥的氧消耗率(OCRs)中獲得系數(shù),然后可以調(diào)整系數(shù)以獲得最佳擬合。

對于硫酸鹽還原的測量,收集的酸化和未處理的污泥被轉(zhuǎn)移至500毫升的藍(lán)色瓶中,并放置在磁力攪拌器上。頭空間不斷用氮?dú)鉀_洗。將8毫升的糞便轉(zhuǎn)移到12毫升的Labco Exetainers中,這些Exetainers在氮?dú)饬飨玛P(guān)閉。通過橡膠隔膜將10微升的35S–SO42-溶液(10kBq·μl?1)注入到每個Exetainer中,然后在15℃水平搖動時孵育1、2和4小時(每個孵育時間n=10)。在孵育結(jié)束時,向每個Exetainer中注入1毫升20%(w/v)ZnAc溶液,然后劇烈搖動以捕獲硫化物并停止樣品中的生物活性。為了確定硫酸鹽還原率(SRR),通過結(jié)合酸鉻蒸餾(Fossing&Jorgensen,1989)來分離注射的放射性硫酸根化合物中的還原放射性硫化合物,其中還原硫被釋放為硫化氫,并通過氮?dú)饬鲝臉悠分谐ァA蚧镌俅卧?%ZnAc溶液中被捕獲,通過閃爍計數(shù)器(Hewlett Packard TriCarb 2900TR)測定還原硫池的放射性。在蒸餾之前,還原硫池中的放射性硫池的放射性被測定。

然后,從以下方程計算SRR:

其中a是還原硫池的放射性,A是35S-硫酸根池的放射性,[SO42-]是糞液中的硫酸根濃度,1.06是考慮硫酸還原細(xì)菌對35S和32S之間分餾的常數(shù),t是時間(Fossing&Jorgensen,1989)。

在三個單獨(dú)的漿液樣品(每個3.0ml)中測量甲烷的產(chǎn)生,所述漿液樣品在15℃下在氣密小瓶(Labco Exeters,High Wycombe)中孵育,然后攪拌并用氮?dú)饣亓饕跃S持漿料中的缺氧以及從頂部空間和漿料中去除初始甲烷。將小瓶孵育約19小時。從頂部空間對氣體進(jìn)行取樣,并在氣相色譜儀(Chrompack 438A,Packard Instrument B.V.)上分析甲烷,通過孵育期間頂部空間濃度的線性增加來估計甲烷產(chǎn)量。

在對Jensen等人(1995)描述的程序進(jìn)行修改后,在氣相色譜儀上測量短鏈脂肪酸以及山梨酸、苯甲酸、乳酸、琥珀酸和馬尿酸的濃度。簡言之,將10g糞肥在90ml稀釋劑(28mM NaOH和11.1mM內(nèi)標(biāo)2-乙基丁酸)中稀釋,并加入濃HCl(0.5ml)和乙醚(2ml)并混合。離心后,將醚層轉(zhuǎn)移到含有10ml衍生試劑N-甲基-N(叔丁基二甲基甲硅烷基)-三氟乙酰胺(Fluka)的小瓶中。將混合物在70℃下孵育20分鐘,然后在室溫下放置48小時。在配備有火焰離子化檢測器和30m SGE BP1柱的Hewlett-Packard氣相色譜儀(型號6890)上進(jìn)行分析。

硫化物使用硫化物微傳感器(Unisense A/S,Aarhus,丹麥)進(jìn)行測定(Jeroschewski等人,1996)。通過向污泥中添加濃鹽酸來降低pH,確定了酸可溶硫化物,包括初始硫化物和由于降低pH而生成的過剩硫化物。