Flow and epiphyte growth effects on the thermal, optical and chemical microenvironment in the leaf phyllosphere of seagrass (Zostera marina)  

水流和附生生物生長對海草（大葉藻）葉際熱、光及化學(xué)微環(huán)境的影響  

來源: Journal of the Royal Society Interface, Volume 17, Issue 171, 2020, Article ID 20200485

《皇家學(xué)會界面雜志》第17卷第171期，2020年，文章編號20200485  

 

摘要  

本研究通過微傳感器技術(shù)揭示了海岸富營養(yǎng)化導(dǎo)致的附生生物膜過度生長對海草（大葉藻）葉際物理化學(xué)微環(huán)境的嚴重影響。研究發(fā)現(xiàn)：1）附生生物膜會形成擴散邊界層（DBL）和熱邊界層（TBL），阻礙氧氣和熱量交換，導(dǎo)致葉面溫度最高升高0.8°C；2）附生生物減少到達葉面的光量和改變光質(zhì)，降低植物光合作用；3）黑暗條件下附生生物呼吸加劇缺氧環(huán)境，導(dǎo)致葉際產(chǎn)生植物毒性物質(zhì)一氧化氮（NO）；4）水流速度（0.5 vs 5 cm/s）和光照強度共同調(diào)節(jié)這些效應(yīng)。這些微環(huán)境變化可能使生活在溫度脅迫閾值附近的海草面臨更嚴重的熱應(yīng)激風險。

 

研究目的  

探究：1）附生生物膜如何改變海草葉際的物理化學(xué)微環(huán)境；2）水流速度和光照強度如何調(diào)節(jié)附生生物的影響；3）附生生物導(dǎo)致的微環(huán)境變化對海草健康的潛在后果。

 

研究思路  

1. 實驗設(shè)計：采集帶有天然附生生物膜的大葉藻葉片，在控制條件下（兩種水流速度：0.5/5 cm/s；四種光照：黑暗/低光/飽和光/強光）進行實驗  

2. 多維測量：使用三種微傳感器原位測量葉際微環(huán)境：  

   ? 電化學(xué)微傳感器：測量O?濃度梯度與通量  

 

   ? 熱電偶微傳感器：記錄溫度分布  

 

   ? 標量輻照度微傳感器：分析光微環(huán)境（強度與光譜）  

 

3. 數(shù)據(jù)分析：計算邊界層厚度、物質(zhì)通量（菲克定律）、統(tǒng)計檢驗（三因素ANOVA）評估各因子顯著性  

 

測量的數(shù)據(jù)及研究意義  

1. 氧氣微剖面（圖1，表1）：  

   ? 測量數(shù)據(jù)：附生生物使總擴散距離（TDD）增加6倍（最厚達3.11 mm），黑暗時葉面O?降低79-97%  

   ? 研究意義：量化了附生生物對氣體交換的阻礙效應(yīng)，揭示其導(dǎo)致葉際缺氧的物理機制  

 

 

2. 光微環(huán)境數(shù)據(jù)（圖2-3，表2）：  

   ? 測量數(shù)據(jù)：附生生物使PAR光衰減53-56%，最強吸收出現(xiàn)在673 nm（葉綠素a吸收峰）  

   ? 研究意義：證實附生生物通過 shading 和光譜過濾雙重機制限制海草光合作用  

 

 

 

3. 溫度分布（圖5，表3）：  

   ? 測量數(shù)據(jù)：低速水流下附生葉片溫度最高升高0.56°C，TBL厚度達7.5 mm  

   ? 研究意義：首次發(fā)現(xiàn)海草葉際存在顯著熱邊界層，表明附生生物可能加劇熱應(yīng)激  

 

 

4. 一氧化氮產(chǎn)生（圖6）：  

   ? 測量數(shù)據(jù)：厭氧附生生物膜內(nèi)NO濃度達3.9 μmol/L，向葉片擴散通量-18 nmol m?2s?1  

   ? 研究意義：發(fā)現(xiàn)附生生物導(dǎo)致的新脅迫因子——植物毒性NO的生成  

 

結(jié)論  

1. 附生生物膜通過物理阻擋（增加擴散距離）和代謝活動（呼吸耗氧）共同塑造葉際微環(huán)境，導(dǎo)致O?和熱量積累、光照衰減  

2. 低速水流加劇附生生物的負面效應(yīng)（更厚的邊界層、更高溫度），而高速水流部分緩解但增強光衰減（生物膜壓縮效應(yīng)）  

3. 葉際缺氧誘導(dǎo)厭氧代謝產(chǎn)生植物毒性物質(zhì)NO（濃度達3.9 μmol/L），可能直接損害海草健康  

4. 附生生物引起的葉面升溫（最高+0.8°C）可能使海草更易受到全球變暖的疊加脅迫  

 

使用丹麥Unisense電極測量數(shù)據(jù)的研究意義  

本研究中使用丹麥Unisense公司的多種微傳感器（OX-25氧傳感器、T50溫度傳感器、NO-100一氧化氮傳感器）提供了關(guān)鍵的技術(shù)支撐：  

 

1. 高分辨率原位測量能力：  

   ? 傳感器尖端尺寸小（O?:25μm、溫度:50μm、NO:100μm），可實現(xiàn)毫米尺度的垂直剖面測量（100μm步長），準確捕捉葉際微梯度而不會破壞天然微環(huán)境結(jié)構(gòu)  

 

2. 多參數(shù)同步解析機制：  

   ? O?微傳感器：量化了DBL厚度和O?通量變化，直接證明附生生物使O?擴散距離增加6倍（表1）  

 

   ? 溫度微傳感器：首次記錄到海草葉際TBL的存在，發(fā)現(xiàn)附生生物導(dǎo)致葉面升溫0.56°C（表3）  

 

   ? NO微傳感器：檢測到厭氧微區(qū)產(chǎn)生的植物毒性NO（3.9 μmol/L），為解釋附生生物致病機制提供新證據(jù)  

 

3. 動態(tài)過程量化：  

   ? 通過測量不同光照/水流組合下的實時變化，揭示物理環(huán)境（流速）與生物過程（附生生物代謝）的交互作用  

 

   ? 例如：發(fā)現(xiàn)低速水流下TBL更厚（7.5 mm），導(dǎo)致熱消散效率降低  

 

4. 技術(shù)可靠性驗證：  

   ? 所有傳感器均經(jīng)過嚴格校準（O?：厭氧/飽和水校準；NO：NaNO?梯度校準）  

 

   ? 電機驅(qū)動精確定位（微米級精度），確保測量點的一致性  

 

Unisense微傳感器在本研究中發(fā)揮了不可替代的作用，其高精度原位測量能力使研究者能夠：1）同時量化物理（擴散、熱傳輸）、化學(xué)（O?/NO濃度）和生物（代謝通量）過程的耦合效應(yīng)；2）揭示傳統(tǒng)宏觀測量無法發(fā)現(xiàn)的微尺度現(xiàn)象（如局部厭氧區(qū)NO生成）；3）為理解附生生物脅迫機制提供直接實驗證據(jù)。這些數(shù)據(jù)最終支撐了"附生生物通過改變微環(huán)境物理化學(xué)特性間接危害海草"的核心結(jié)論。